Preparative Chromatography
כרומטוגרפיה פרפרטיבית
ביואנליטיקס מציעה את מגוון הפתרונות הרחב ביותר בתחום הכרומטוגרפיה הפרפרטיבית עם המערכות והמוצרים המתקדמים של חברת Teledyne ISCO
שאלות נפוצות — כרומטוגרפיה פרפרטיבית: אספקה ו-Scale-up
מי מספק מערכות פלאש-כרומטוגרפיה פרפרטיבית (CombiFlash / Teledyne ISCO) בישראל ותומך בהן?
BioAnalytics מספקת בישראל מערכות Flash ו-Preparative Chromatography של Teledyne ISCO — ובהן CombiFlash NextGen ו-AccqPrep — לצד עמודות RediSep, התאמת גלאים, התקנה, הדרכה ותמיכה אפליקטיבית. הבחירה בין הדגמים נעשית לפי מסת הדוגמה, קושי ההפרדה, Normal או Reversed-Phase, קצב הזרימה והלחץ, סוג הגילוי ורמת הטוהר. לדוגמה, CombiFlash NextGen 300+ מגיע עד 300 mL/min ועד 300 psi. לפני רכישה מומלץ לבצע ניסוי עם דוגמה אמיתית ולהגדיר מראש תפוקה, התאוששות, טוהר וצריכת ממס.
איך מבצעים scale-up מ-TLC או מפלאש אנליטי לכרומטוגרפיה פרפרטיבית?
במעבר מ-TLC ל-Flash בוחרים תחילה ממס שנותן הפרדה שימושית בין הכתמים, ורצוי כימיית סיליקה דומה בפלטה ובעמודה. ערכי Rf משמשים לבניית gradient ולהערכת מיקום האלוציה ביחידות column volume (בקירוב CV≈1/Rf בתנאי TLC זהים). את גודל העמודה קובעים לפי מסת הדוגמה וקושי ההפרדה: ככל שהפרש ה-Rf קטן יותר, מפחיתים העמסה. ב-scale-up שומרים על אותה פאזה נייחת, אותו gradient ביחידות CV ואותו אחוז העמסה. לפני מעבר לכמויות גדולות מבצעים scouting run ומאמתים טוהר והתאוששות.
לייעוץ מקצועי וכיול מוסמך: חייגו 072-2429555.
FAQ — Flash & Preparative Chromatography (CombiFlash)
Who supplies CombiFlash / Teledyne ISCO flash & preparative chromatography systems in Israel?
BioAnalytics supplies Teledyne ISCO flash and preparative chromatography systems in Israel, including CombiFlash platforms and preparative HPLC. Choose from the crude-sample mass, required purity and recovery, normal- or reversed-phase chemistry, pressure and flow range, column size, solvent compatibility, detector requirements and fraction-collection capacity. Flash chromatography is usually the faster, lower-pressure route for routine purification; preparative HPLC is preferred when higher efficiency and resolution are needed. Scale-up should be based on loading studies, not column diameter alone.
For expert advice and accredited calibration: call +972-72-2429555.
שאלות ותשובות
איך בוחרים בין Flash, Prep HPLC ו-SFC?
אילו נתונים דרושים להתאמת מערכת פלאש?
איך בוחרים מחסנית Flash?
מתי צריך גלאי נוסף מעבר ל-UV?
נכתב ונבדק על ידי Dani Shahar וצוות היישומים של BioAnalytics
כרומטוגרפיה פרפרטיבית ופלאש — מדריך בחירה
מה ההבדל בין פלאש כרומטוגרפיה לכרומטוגרפיה פרפרטיבית (Prep-HPLC)?
Flash chromatography (e.g. CombiFlash) is automated low-to-medium-pressure purification for rapidly isolating grams from a reaction mixture, with disposable cartridges and UV/ELSD detection. Prep-HPLC runs at high pressure with higher resolution for precise purification of closely-eluting compounds or smaller high-purity quantities. Choose by load, separation difficulty and required purity.
נכתב ונבדק על ידי Dani Shahar וצוות היישומים של BioAnalytics · יבואן Teledyne ISCO בישראל
איך בוחרים גודל מחסנית Flash לפי מסת הדוגמה?
גודל המחסנית נגזר ממסת הדוגמה ומקושי ההפרדה (הפרש ה-Rf). ככלל אצבע לסיליקה (normal-phase), יחס הטעינה הוא כ-1%–5% w/w (מסת דוגמה חלקי מסת סיליקה); הפרדות קלות מאפשרות עד ~10%, והפרדות קשות (ΔRf קטן) דורשות פחות מ-1%.
| גודל מחסנית (סיליקה) | הפרדה קלה (~5%) | הפרדה קשה (~1%) |
|---|---|---|
| 4 g | ~200 mg | ~40 mg |
| 12 g | ~600 mg | ~120 mg |
| 40 g | ~2 g | ~400 mg |
| 120 g | ~6 g | ~1.2 g |
ערכים כלליים בלבד — יש לאמת עם דוגמה אמיתית ו-scouting run. ככל שהפרש ה-Rf קטן יותר, מפחיתים העמסה ומגדילים את המחסנית.
איך בונים עקומת כיול מסה מולקולרית ב-SEC/GPC?
ב-SEC/GPC המסה המולקולרית נגזרת מזמן/נפח האלוציה מול עקומת כיול. מזריקים סדרת סטנדרטים צרים בעלי מסה ידועה (למשל pullulan או PEG/PEO למערכות מימיות, polystyrene לממסים אורגניים), משרטטים log(MW) מול נפח האלוציה, ומתאימים את האנליט לעקומה. חשוב שהסטנדרטים יהיו מאותו סוג פולימר וטווח מסה שמכסה את הדוגמה, ושתנאי הריצה יהיו זהים בכיול ובמדידה.
כמה דוגמה אפשר להעמיס על מחסנית Flash של 12 גרם?
כ-120 mg בהפרדה קשה ועד ~600 mg בהפרדה קלה (כ-1%–5% w/w סיליקה); ככל שהפרש ה-Rf קטן יותר מפחיתים העמסה. מומלץ לאמת עם scouting run.
מתי עוברים ממחסנית סיליקה ל-C18 בפלאש?
סיליקה (normal-phase) לתרכובות פחות קוטביות בממסים אורגניים; C18 (reversed-phase) לתרכובות קוטביות/מסיסות-מים ולמעבר חלק יותר ל-Prep-HPLC. הבחירה לפי קוטביות האנליט והממס.
נכתב על-ידי דני שחר וצוות האפליקציה של BioAnalytics.